眾所周知，基礎科研離不開實驗操作，而我們科研小白總是在實驗實操中手忙腳亂，不知道如何避免操作失誤，也不知道咋解決在實驗中遇到疑難雜症，辛辛苦苦重複了好多次的實驗，總是折在某個環節……
其實，實驗操作並沒有想象中那麼難，難就難在我們沒有真正掌握實驗原理，沒有把握住實驗過程中需要注意的細節。
比如：
在RT-PCR 實驗中，RT試劑盒從冰箱拿出，應該充分解凍，瞬離後，混勻，放於冰上，可在冰上加樣。試劑可以用數字貼紙編號，避免漏加、錯加試劑。
在RNA 抽提實驗中，要避免外源酶的汙染，外源酶會造成 RNA 的降解，造成 RNA 得率太低，或者徹底失敗，而外源酶又是無處不在的。
在Western blot 實驗中，配膠時，建議先加水，再加Tris-HCL緩衝液，並且每加一種液體就混勻膠液。加入的TEMED有毒，務必在通風櫥中操作，並且加入後立即混勻、灌膠。
……
實驗中需要注意的細節很多，一著不慎滿盤皆輸。為了幫助大家解決實驗過程中面臨的重重難題，解螺旋整理了這份《酸談實驗資料包》，包含
40+基礎實驗、8+熱門實驗詳細教程
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除了詳細的實驗課件，我們還專門配套了
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40+基礎實驗全面覆蓋 填平實驗中遇到的坑
為了幫助大家解決實驗過程中面臨的重重難題，酸談實驗課程手把手教大家40+基礎實驗，包括
13個表達檢測實驗、16個表型檢測實驗、11個機制探索實驗，
每個實驗都詳細介紹了樣品製備、操作要點、資料分析，填平你在實驗中遇到的坑
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13個表達檢測實驗
1.DNA 甲基化晶片
高通量甲基化晶片 Infinium Human Methylation 450K BeadChip 能夠對人全基因組45萬個甲基化位點進行檢測，覆蓋了上一代 27K 甲基化晶片 90%的位點，並同時增加了 CpG 島以外的 CpG 位點、人類幹細胞非 CpG 甲基化位點、正常組織與腫瘤（多種癌症）組織差異甲基化位點、編碼區以外的 CpG 島、miRNA 啟動子區域和已透過 GWAS 的疾病相關區域的位點。
2.第二代 DNA 測序技術
Illumina/Solexa Genome Analyzer 測序的基本原理是邊合成邊測序。在 Sanger 等測序方法的基礎上，透過技術創新，用不同顏色的熒游標記四種不同的 dNTP，當 DNA 聚合酶合成互補鏈時，每新增一種 dNTP 就會釋放出不同的熒光，根據捕捉的熒光訊號並經過特定的計算機軟體處理，從而獲得待測 DNA 的序列資訊。
3.基因晶片
基因晶片的測序原理是雜交測序方法，即透過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法。
4.高通量檢測
高通量檢測技術可以一次檢測多個樣品中成千上萬個基因的變化，根據高通量技術的不同，可以檢測不同的變化，不僅可以檢測 DNA、RNA、蛋白的丰度，還可以檢測修飾程度，如蛋白磷酸化，DNA 甲基化等等。
5.circRNA 實驗
從組織或細胞中提取的 total RNA 中，通常含有多種 RNA，circRNA 實驗首先要去除樣 本中的核糖體 RNA 和 poly-A RNA 干擾，並用 RNase 酶消化掉線性 RNA，使 circRNA 富集， 這樣才能對 circRNA 進行準確分析。
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16個表型檢測實驗
1.細胞增殖
細胞增殖是生物體的重要生命特徵，細胞以分裂的方式進行增殖，我們將為大家詳細介紹
3D 腫瘤球形成實驗、MTT 增殖實驗、克隆形成實驗、細胞增殖檢測實驗方法
。
2.細胞週期檢測實驗
細胞週期（cell cycle）是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程。
3.細胞凋亡
細胞凋亡是細胞死亡的一種型別，酸談實驗課程包含
細胞凋亡檢測（TUNEL 法）、AnexinV/7AAD 雙染色檢測細胞凋亡、線粒體膜電位檢測
等細胞凋亡實驗。
4.血管新生
血管新生是在原有的毛細血管或者微靜脈基礎上，透過內皮細胞的增殖、分化和遷移，以芽生或非芽生的形式生成新生的血管。
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11個機制探索實驗
1.訊號轉導
訊號通路是指生物學訊號從細胞外向細胞內傳遞的過程，透過這種訊號的傳遞對細胞內的生物學過程進行調控。
2.轉錄調控
隨著分子生物學研究方法的不斷髮展，轉錄調控的研究也來越火熱，酸談實驗課程整理了轉錄調控方向實驗Protocol，涵蓋實驗原理、實驗操作流程、實驗操作要點、實驗分組設計、資料處理與繪圖……
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8+熱門實驗protocol分享 手把手教你實操
辛辛苦苦做實驗發文章，如果因為實驗中的某個環節出了問題而功虧一簣，實在太可惜了。
酸談實驗課程為大家分享8+熱門實驗protocol，包括
反轉錄PCR、PCR引物設計、RNA抽提、RT-PCR、WB、Transwell、免疫組化影象分析、常用訊號通路套路等
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反轉錄PCR
RNA反轉錄合成cDNA，以cDNA為模板經過變性（讓cDNA能夠充分開啟）、 退火（讓引物結合到模板DNA上）和延伸（讓DNA聚合酶（Taq酶）開始合成DNA， 讓新的DNA鏈按照模板的鹼基順序延長下去）等過程擴增出很多的目的片段。
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PCR引物設計
引物設計是PCR技術中至關重要的一環，使用不合適的PCR引物容易導致實驗失敗。
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RNA抽提
RNA抽提有很多種方法，其中TRIzol法是最流行的。TRIzol法很快速，且能抽提多種屬總RNA，對少量的組織和細胞以及大量的組織和細胞都能有效分離，能抽提不同分子量大小的多種RNA，避免DNA和蛋白的汙染，抽提出來的RNA適用於多種實驗。
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RT-PCR
全稱反轉錄·聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain reaction， RT-PCR）是將RNA 的反轉錄和cDNA 的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。
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Western Blotting
蛋白免疫印跡（Western Blotting）是將電泳分離後的蛋白質從凝膠轉移到NC膜或PVDF膜上，然後用特異 性抗體檢測某特定蛋白的一種蛋白質檢測技術。
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免疫組化影象分析
使用IPP6軟體分析單張免疫組化影象、分析多張免疫組化影象、批次分析免疫組化影象，包括校正圖片、選定測量專案、選定測量範圍、測量、輸出資料等詳細步驟。
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細胞劃痕實驗Transwell
Transwell 是一類有通透性的杯狀的裝置，放入培養板後，分為兩室：Transwell 小室內稱上室，盛裝上層培養液；培養板內稱下室，盛裝下層培養液。上下層培養液以聚碳酸酯膜（Polycarbonate Membrane）相隔。
細胞種在上室內，因聚碳酸酯膜有通透性，故可研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。
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文獻場景還原 貓大親測試劑種草
多讀文獻可以幫我們瞭解前沿研究動態和進展，找到立論依據，獲得實驗設計靈感。
當然，文獻閱讀也是講究方法的，貓大老師為大家精選了多篇經典文獻，透過
還原文獻場景，復現材料方法和結果部分寫作套路，更有貓大親測試劑種草，全方位幫你避坑~
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