2021年8月31日，美國網球公開賽打響，首個冷門出現，本土名將伊斯內爾表現不佳，連丟三盤輸給手持外卡參賽的中島布蘭登，多位參賽選手臨時退出，其中就有前賽事冠軍西里奇，前法網冠軍奧斯塔彭科，主要是受到傷病影響，不能進行高強度比賽，很難繼續堅持。

美國名將伊斯內爾是男單19號種子，曾拿過大師賽冠軍，大滿貫最好成績是溫網四強，這次他本土作戰，受到當地球迷的期待，首輪對陣手持外卡參賽的中島布蘭登，伊斯內爾狀態低迷以6-7（7）/6-7（6）/3-6連丟三盤，不敵中島布蘭登首輪出局，爆出開賽以來首場冷門。

前美網男單冠軍克羅埃西亞名將西里奇因傷退賽，他以7-6（4）/7-6（3）連贏兩盤後，德國選手科爾什雷伯以6-2/6-1連扳兩盤，決勝盤科爾什雷伯2-0領先，西里奇堅持不住只能退賽，法國名將特松加在賽前就宣佈退出，日本選手杉田祐一替補，但是他在首輪就被淘汰出局。

男單5號種子盧布列夫表現強勢，以6-3/7-6（3）/6-3淘汰克羅埃西亞老將卡洛維奇，8號種子挪威一哥魯德以6-3/6-2/6-2橫掃日本選手杉田祐一，11號種子阿根廷名將施瓦茨曼以7-5/6-3/6-3完勝比蘭基斯，12號種子阿利亞西姆以7-6（0）/3-6/7-6（1）7-6（8）淘汰東斯科伊。

15號種子迪米特洛夫以6-1/7-6（3）/6-3戰勝美國選手裡菲斯，16號種子智利一哥加林以6-3/4-6/6-4/7-6（4）擊敗斯洛伐克選手高波斯。

女單8號種子新科法網冠軍克雷吉茨科娃送蛋，以6-0/6-4橫掃澳大利亞選手夏爾瑪，9號種子西班牙名將穆古魯扎以7-6（4）/7-6（5）戰勝勁敵維基奇，12號種子羅馬尼亞名將哈勒普以6-4/7-6（3）擊敗義大利選手吉奧爾吉。

16號種子德國名將科貝爾上演大逆轉，以3-6/6-4/7-6（3）淘汰烏克蘭選手雅斯特雷，19號種子哈薩克一姐萊巴金娜以6-2/6-3完勝白俄羅斯選手薩斯諾維奇，32號種子俄羅斯選手亞歷山德洛娃以6-3/6-2橫掃埃拉尼。

美國名將柯林斯以6-2/6-4完勝西班牙選手納瓦羅，斯洛伐克老將庫科娃以7-5/6-1擊敗美國小將李安，前美網冠亞軍之戰，斯蒂芬斯以6-3/1-6/7-6（7）險勝凱斯，13號種子美國名將布拉迪，大滿貫冠軍奧斯塔彭科，英國一姐孔塔，這些名將都受到傷病困擾，只能宣佈退賽。